Video: Sanger DNA ua ntu zus ua haujlwm li cas?
2024 Tus sau: Stanley Ellington | [email protected]. Kawg hloov kho: 2023-12-16 00:17
Sanger sequencing tshwm sim hauv kev tsim cov khoom txuas ntxiv ntawm ntau qhov ntev txiav nrog Dideoxynucleotides ntawm 3' kawg. Tom qab ntawd cov khoom txuas ntxiv raug cais los ntawm Capillary Electrophoresis lossis CE. Cov lwg me me tau txhaj los ntawm hluav taws xob tam sim no mus rau hauv iav ntev capillary uas muaj cov gel polymer.
Hauv txoj kev no, Sanger txoj hauv kev DNA ua ntu zus yog dab tsi?
Sanger sequencing , kuj tseem hu ua kev txiav cov saw txoj kev , yog txheej txheem rau DNA sequence Raws li kev xaiv kev koom ua ke ntawm chain-terminating dideoxynucleotides (ddNTPs) los ntawm DNA polymerase thaum nyob rau hauv vitro DNA rov ua dua. Nws yog tsim los ntawm Frederick Sanger thiab cov npoj yaig hauv xyoo 1977.
Tsis tas li, yuav ua li cas thiaj txiav cov saw ua haujlwm? Sanger DNA ua ke tseem paub tias yog saw - kev txiav txim txoj kev ntawm ua ke . ddNTPs ua rau kev txiav txim ntawm DNA strand vim ddNTPs tsis muaj 3'-OH pawg yuav tsum tau rau phosphodiester bond tsim ntawm nucleotides. Yog tsis muaj daim ntawv cog lus no, lub saw ntawm nucleotides raug tsim yog xaus.
Tsuas yog li ntawd, vim li cas peb thiaj ua Sanger sequencing?
Sanger sequencing yog a txoj kev ntawm DNA sequence Raws li kev xaiv ntawm kev sib koom ua ke ntawm saw-txiav Dideoxynucleotides los ntawm DNA polymerase thaum nyob rau hauv vitro DNA rov ua dua. Nws tseem muaj qhov kom zoo dua nyeem luv ua ke thev naus laus zis (zoo li Illumina) uas nws tau tsim khoom DNA sequence nyeem ntawm> 500 nucleotides.
Puas yog Sanger sequencing muaj tseeb?
Sanger sequencing nrog 99.99% qhov tseeb yog "tus qauv kub" rau kev tshawb fawb soj ntsuam ua ke . Txawm li cas los xij, NGS cov thev naus laus zis tshiab kuj tseem dhau los ua qhov chaw tshawb fawb tshawb fawb vim tias lawv muaj peev xwm nkag tau zoo dua thiab txo tus nqi ib tus qauv.
Pom zoo:
Lub luag haujlwm ntawm cov neeg ua haujlwm ua haujlwm ua haujlwm li cas?
Hauv ICS, cov neeg ua haujlwm no yog Tus Thawj Saib Xyuas Haujlwm thiab suav nrog: Tus Thawj Saib Xyuas Ntaub Ntawv Hauv Pej Xeem, uas ua tus coj mus rau cov ntaub ntawv rau cov koom nrog sab hauv thiab sab nraud, suav nrog kev tshaj xov xwm lossis lwm lub koom haum nrhiav cov ntaub ntawv ncaj qha los ntawm qhov xwm txheej lossis xwm txheej
Koj puas tuaj yeem nchuav cov pob zeb ua ntu hauv ntu?
Ncuav cov pob zeb ua ntu me me Thaum lub tsheb thauj khoom mus txog qhov kawg ntawm ntu, nthuav cov pob zeb ua kom sib npaug, thiab kov siab dua li daim ntawv, nrog rau lub laj kab tso pa/rake. Tsis txhob sau tag nrho daim foos lossis ntu ntu loj vim tias cov pob zeb ntawm cov pob zeb ntxiv koj yuav rub rov qab nrog lub rooj tsav tsheb screed yuav hnyav heev
Txoj kev qhuab qhia zuj zus ua haujlwm li cas?
Kev qhuab qhia zoo yog txheej txheem rau kev daws teeb meem kev ua haujlwm uas tsis tau raws li qhov xav tau thiab sib tham txog cov qauv kev ua haujlwm. Lub hom phiaj tseem ceeb ntawm kev qhuab qhia zoo yog los pab tus neeg ua haujlwm kom nkag siab tias muaj teeb meem kev ua haujlwm lossis lub sijhawm rau kev txhim kho muaj nyob
Vim li cas nws tseem ceeb rau kev txiav txim siab ua ntu zus ntawm cov haujlwm?
Kev Ua Si Sequencing thiab Network Diagrams. Kev ua ntu zus los tshuaj xyuas txhua yam dej num hauv WBS nrog lub hom phiaj ntawm kev txheeb xyuas kev sib raug zoo ntawm lawv thiab txheeb xyuas txhua lub sijhawm sib raug zoo ntawm cov haujlwm. Kev sib raug zoo ntawm lub sijhawm ua haujlwm yog qhov tseem ceeb vim tias lawv tswj xyuas cov haujlwm ua ntu zus thiab ua haujlwm pib thiab hnub kawg
Dab tsi yog qhov kev lees paub ua ntu zus rau PstI?
Muaj nuj nqi. PstI cleaves DNA ntawm qhov kev lees paub ib ntus 5'-CTGCA/G-3' tsim cov khoom tawg nrog 3'-cohesive termini. Qhov no cleavage yields nplaum kawg 4 puag khub ntev. PstI yog catalytically active raws li ib tug dimer