Cov txheej txheem:

Koj xaiv clones li cas?
Koj xaiv clones li cas?

Video: Koj xaiv clones li cas?

Video: Koj xaiv clones li cas?
Video: koj xaiv tus zoo li cas 2024, Kaum ib hlis
Anonim

Thaum twg xaiv ib clone , nco ntsoov tias cov hauv paus hniav muaj zog, dawb thiab eagerly protruding los ntawm qhov loj hlob nruab nrab. Yog tias cov hauv paus hniav yog xim av thiab shriveled, los yog lwm yam tshwm sim tsis muaj zog, muab nws rov qab thiab nrhiav qhov zoo dua.

Tsis tas li ntawd, ua li cas koj clone ib lub cell?

  1. suav cov hlwb thiaj li yuav muab ~ 16,000 hlwb rau hauv thawj qhov dej (A1) ntawm 96-zoo phaj uas muaj 200 µL ntawm nruab nrab.
  2. Tshem tawm 100 µL los ntawm A1 uas muaj cov hlwb thiab sib tov nrog B1, pipetting nce thiab nqis 3x sib tov zoo ua ntej tshem tawm 100 µL thiab sib tov nrog C1, thiab lwm yam.

Tsis tas li ntawd, koj yuav ua li cas xaiv ib lub cell colony? Muab lub phaj tso rau hauv lub tshuab tsom iav kom xaiv qhov tsis muaj kev noj qab haus huv cheeb tsam . Xaiv cov cheeb tsam siv P-20 pipette teem rau 10ul. Ua tib zoo xaiv ib thaj chaw tsis tawg lub thaj chaw hauv ib leeg hlwb , thiab hloov mus rau hauv 96-zoo phaj nrog trypsin. Pipette nce thiab nqis ob peb zaug kom disperse lub thaj chaw.

Raws li txoj cai, koj siv lub tog raj kheej clone li cas?

Siv sterile medium forceps, khaws a cloning lub tog raj kheej . Maj mam nias lub tiaj hauv qab ntawm lub lub tog raj kheej mus rau hauv cov roj silicone du thiab tshem tawm nrog ib qho kev txav ntsug tam sim. Yog tias ua tau zoo, qhov no yuav muab txawm tias faib cov roj rau hauv qab ntawm lub lub tog raj kheej . Teeb lub lub tog raj kheej tshaj ib lub colony.

Yuav ua li cas koj xaiv colonies rau cov kab mob ruaj khov?

Cov txheej txheem rau tsim cov kab ruaj khov ntawm tes yuav tsum muaj ob peb kauj ruam raws li qhia hauv qab no:

  1. Tsim kom muaj kab nkhaus tua los txiav txim siab xaiv cov tshuaj tua kab mob zoo tshaj plaws.
  2. Hloov cov hlwb uas xav tau plasmid construct(s)
  3. Xaiv thiab nthuav cov kab mob polyclonal ruaj khov.
  4. Txheeb xyuas ib qho clones los ntawm kev txo qis thiab nthuav dav.

Pom zoo: